血生化檢測

我們在前文《齧齒動（dòng）物血生化項目分析（上）》中介紹了齧齒動物的蛋（dàn）白質與肝膽功能指標（biāo）以及（jí）腎髒功能指標的檢測意義。本文我（wǒ）們將繼（jì）續對（duì）齧齒動物的脂質代謝、胰（yí）腺功能、糖代謝等相（xiàng）關常見血生化指標進行介紹。

脂（zhī）代謝（xiè）檢測

脂質的運輸對機體內細胞功能、代（dài）謝（xiè）等起著至關（guān）重要（yào）的（de）作用，此（cǐ）外它還對組織起著保護作用，也作為生物體最重要的能量來源之一。由於脂質具（jù）有很廣泛的作用，因此其穩態也會隨著機體疾病（bìng）等發生變化（huà）。

1.總膽固醇（Total cholesterol, TC）

血清總膽固醇指（zhǐ）血液中各（gè）脂蛋白（bái）所含膽固醇總和。齧齒類動物的脂代謝（xiè）指標與人（rén）類相比差異明顯。大小鼠體內的大部分膽固醇都（dōu）以高（gāo）密度脂蛋白形式存在，且缺乏膽固醇酯轉（zhuǎn）運蛋白（CETP）。膽固醇濃度的增加多見於動物內分泌、肝髒或腎髒疾病；降低則常見於動物營養不良等（děng）。

2.甘油三酯（Triglyceride, TG）

甘油三酯（zhǐ）構（gòu）成脂肪組織，參與TC合成以及血栓形成。需要注意的是，小鼠的血脂比（bǐ）較穩定，對（duì）抗高血脂的能力很強（qiáng），甘油三酯不容易升高，尤其C57BL小鼠一般不適合單純用於高甘油三酯血症的造（zào）模。TG升高多見於動物過度肥胖、糖尿（niào）病等，而營養不良則是導致其降低的主要（yào）因素。

3.高密度脂蛋白（High-density lipoprotein, HDL）

高密（mì）度脂蛋白主要由肝髒和小腸合成，含有膽固醇、蛋白質和磷脂，但甘油三酯很少。 與人類和非人靈長類動物不同的是，大鼠體內的HDL濃度高（gāo）於LDL（低密度脂蛋白（bái）膽固醇），這可能是由於大鼠體內缺乏膽固（gù）醇酯轉運蛋白（CETP）所致。

高密度脂蛋白可以清除體內膽固醇，當HDL升高時，並非病理表現，無需（xū）關注；當（dāng）動物出現動脈硬化、糖尿病、慢性腎衰時，HDL表現為降低，且老年（nián）動物更（gèng）易（yì）出現降低情況。

4.低密度脂蛋（dàn）白（Low-density lipoprotein, LDL）

低密度脂（zhī）蛋（dàn）白由極（jí）低密度脂蛋白轉化而來，含有豐富的蛋白（bái）質（zhì）、少量的膽固醇和甘油（yóu）三酯。因此，LDL出現降低（dī）的情況，提示動物機體血脂不高，可不予關注；但當LDL出現升高時，應該考慮甲狀腺功能低下、慢性腎衰等，尤其需要關注動脈粥樣硬（yìng）化，LDL是發生動脈粥樣硬化的重要危險指（zhǐ）標（biāo）之一。

5.脂蛋白（Lipoprotein, Lip）

齧齒類動物會在肝髒和小腸中合成（chéng）載脂蛋白（apoB-100和apoB-48），它們是血漿（jiāng）中運輸脂類（lèi）的重要成分。血漿中載脂蛋白水平上升（shēng），與糖尿病腎病、尿毒症等相關；肝髒疾病可使載（zǎi）脂蛋白水平下（xià）降。

6.遊離脂肪酸（Nonestesterified Fatty Acid, NEFA）

遊離脂肪酸在肝髒、脂肪和乳腺組織中合（hé）成。當動物長期使用高脂（zhī）肪/低碳水化合物的飼料時，會導致NEFA合成減少（shǎo）；當動物患有伴有脂肪酶活性增高的高血脂（zhī）症時，會導致血漿中NEFA增加（jiā）。

胰腺功能檢測

胰腺（xiàn）分為兩部（bù）分功能，一部分具（jù）有外分泌功能，這部分又稱為（wéi）胰腺腺泡，是胰腺（xiàn）最大的組成（chéng）部分，用來評估胰腺胰泡（pào）功能的檢測包括澱粉酶和（hé）脂肪酶。另一部分（fèn）具有內分泌功能，許多（duō）檢測都（dōu）可（kě）用來（lái）評估胰腺的內分泌功能，如傳統（tǒng）的血糖監測，以及果糖胺和糖化血紅蛋白等。

1.澱粉（fěn）酶（méi）（Amylase）

澱粉酶分子量較小，可被腎小（xiǎo）球（qiú）濾過，是尿液中唯一可見的血清（qīng）酶（méi）。澱粉酶雖主（zhǔ）要來源於胰腺，但唾液腺和小腸也可以產生。澱粉酶在大鼠和小鼠的唾液腺中的濃度高於其他（tā）實驗動物，因此大小鼠澱（diàn）粉酶的增高也可以考慮涎腺疾病。

通常，血澱粉酶濃度升高最常（cháng）見於急性胰腺炎，此外，慢性胰腺炎的複發期和胰管阻塞（sāi）也可致澱粉酶升高。但是澱粉（fěn）酶升高的水平與胰腺炎的嚴（yán）重程度沒有直接的比例關（guān）係。由（yóu）於澱粉酶可以經（jīng）腎髒排泄，因此任何原因導致腎小球濾過（guò）率降低時，都（dōu）可引起血清澱粉酶升高。

2.脂肪酶（Lipase）

脂（zhī）肪（fáng）酶是一組催化長鏈（liàn）脂肪（fáng）酸甘油酯（zhǐ）水解的（de）酶。大多數血清脂肪酶來源於胰腺（xiàn），少量來（lái）源於胃腸道黏膜。過量的脂肪酶經腎髒濾過，因此在胰腺疾病早期，脂肪酶仍處於正常水平，當病情逐漸加重時，脂肪酶（méi）水平才（cái）出現升高趨勢。

在慢（màn）性進行性胰（yí）腺疾病中，受損的胰腺細胞會被結締組織取代，導致（zhì）不能產生相應的酶，因此澱粉酶和脂肪酶會呈現漸（jiàn）進性降低。脂肪酶活性升高多見於腎髒和肝髒功能異常。此外，服用類固醇藥物可引起（qǐ）脂肪酶升高，但對澱粉酶無影響（xiǎng）。

糖代（dài）謝檢測

1.葡萄糖（Glucose, Glu）

血糖的水平可以用來評估胰（yí）腺功能，其調節機製比較複雜，除（chú）了胰島素分泌缺乏外，胰（yí）高血（xuè）糖（táng）素、甲狀腺（xiàn）素、腎上（shàng）腺（xiàn）素和糖皮質激素都可以使血糖升高；葡（pú）萄糖降（jiàng）低多見於營養不良、慢性貧血等。由於成熟紅細胞會利用葡（pú）萄糖提供（gòng）能量（liàng），因此在使用血漿或者血（xuè）清樣（yàng）本時，應立即將血清或血漿與紅細胞分離（lí），否則在室溫條件下，紅（hóng）細胞會使（shǐ）樣本中血糖含量每小時下降10%。在檢（jiǎn）測葡萄糖前，應對動物進行禁（jìn）食，但對於齧（niè）齒動物（尤其小鼠（shǔ））來說，由於它們屬於夜間進食動物（wù），如果進行夜間禁食，其代（dài）謝（xiè）消耗相（xiàng）當於（yú）靈長類動物（wù）禁食24-48小時（肝髒糖原基本耗盡），因此5-6小時禁食更適合小（xiǎo）鼠。

2.糖化血紅蛋白（Glycated hemoglobin, GHb）

糖化血紅蛋白也稱為血紅蛋白A1C（HbA1c），是血紅蛋白與葡萄糖發生不可逆結合反應的產物。當（dāng）機體發生高血糖時，血紅蛋白與葡萄糖結合增加，從而使糖化血紅蛋白升（shēng）高，因此糖化（huà）血紅蛋白可以直接反映機體血糖（táng）水平。糖化血紅蛋白反（fǎn）映（yìng）的是紅細胞（bāo）壽命（mìng）期間的平均血（xuè）糖（táng）濃（nóng）度，大鼠紅細胞壽命約60天，小鼠紅細（xì）胞壽命約為35-50天。因此和（hé）果糖（táng）胺相比，糖化血紅蛋白反映了更（gèng）長時（shí）間內的（de）血糖水平。但需要注意的是如果檢測是基於高效液相層析法原理，由於（yú）溶血性貧血動物的紅細胞壽命短，因此會導致糖化血紅蛋白（bái）結果出現假性降低（dī）。

3.果糖胺（Fructosamine）

果糖（táng）胺是葡萄糖與蛋白質（尤其白蛋白）發生不可逆結合（hé）的產物。果糖胺升高表示動物持續存在高血糖；但動物發生低蛋白（bái）血症，其血清果糖胺水平會假性降低。

有研究表（biǎo）明，果糖（táng）胺可在臨床研究中，可作為糖尿病動物的血糖監測的有（yǒu）效指標。

其他

在臨床（chuáng）檢測中，還有一些生化項不針對任何器（qì）官或係統，但可以輔助提供一些診斷（duàn）信息，如乳酸脫氫酶、肌酸激酶等。

1.肌酸激酶（creatine kinase, CK）

許多組織中都含（hán）有肌酸激酶（méi），胃腸道、腎髒、脾髒和胰腺中（zhōng）含有少量CK，而骨骼肌、心肌和大腦中含有大量CK。因此當骨骼肌（jī）、心肌受損時，CK會從細胞中滲出，導致血液中CK含量增加。

由於任何損傷肌細胞膜的物質都可以導致血液中CK升高，在實際檢測時，可對CK同工酶檢測來進行區分損傷（shāng）來源。CK有（yǒu）3中主要同工酶：CK-MB（心（xīn）髒型）、CK-BB（腦型）、CK-MM（骨骼型）。比較特殊的是，在大鼠（shǔ）血小板中，CK含量是紅細胞的30倍，且目前僅（jǐn）發現存在CK-BB。

另外，肌內注射、手術等導致（zhì）肌肉損傷可（kě）引起CK升高；   EDTA、陽光直射（shè）或測定不及時可引起樣本中CK假性升高。

2.乳酸脫氫酶（méi）（lactate dehydrogenase, LDH）

乳酸脫（tuō）氫酶是一種催化乳酸轉化為（wéi）丙酮酸的血清（qīng）酶。LDH一（yī）般不具有器官特異（yì）性，它來源廣泛，幾乎所有的組織中都含有LDH，但是物種間分布具有差異。如大鼠骨骼肌中分（fèn）布最多，其次是心肌（77%）和肝髒（41%）。

LDH的升高雖然多見於（yú）肝髒受損和肌肉損傷，但是它缺乏評（píng）價肝損傷的特（tè）異性和敏感性。因此在齧齒動物中，LDH一（yī）般多用於檢測實驗性誘導心肌損傷。為了提高LDH測定（dìng）心肌損傷的特異性，也可以測定其同工酶，即LDH1和LDH2。

需要注意（yì）的是，在常用的實（shí）驗動物中，血（xuè）小板、紅細胞、白細胞、肝髒中都可能會表達LDH同工酶，因此肝損傷、溶血和凝血（xuè）均會混（hún）淆心髒損傷的診斷。另外，感染乳酸脫氫酶增（zēng）高病毒（LDEV）的小鼠，血清中LDH含量可增高3-5倍。

3.C-反應（yīng）蛋白（C-reactive protein, CRP）

CRP是第一個在人類（lèi）身上發現的急性期反應蛋白（Acute Phase Reaction Proteins，APR），目前CRP也（yě）被認為是齧齒動（dòng）物的APR蛋白，肝細胞是（shì）合（hé）成CRP的主要部位。CRP的主要生物學功能是通過於配體（凋（diāo）亡或壞死的細胞（bāo），或入侵的細菌（jun1）、真（zhēn）菌、寄生蟲等的磷酰膽堿）結合，激活補體和單（dān）核吞噬細胞係統，將帶有配體的病原體或病理性細胞清除。在齧齒動物體內，當炎症或創傷（shāng）發生（shēng）後6h內，CRP可迅速升高至上千倍，在疾病治愈後，其含量急速下降。發生心髒病、敗血症和（hé）腫瘤等多種疾病，CRP都會急劇上升。

比較特殊的是，健康大鼠體內CRP值較高，且CRP的水平與年齡相關並呈正比。在健康小鼠和豚鼠血清中，幾乎無法檢出CRP。在這兩種動物體內，CRP不作為急性期蛋白而發揮作用。特別是（shì）豚鼠，在正常狀態和急性期豚鼠（shǔ）血（xuè）清中，都無法檢出CRP，這主要是因為豚鼠CRP基（jī）因中缺乏適當的啟動子（zǐ）區域。