血（xuè）生化（huà）檢測（cè）

血生化檢測是對實驗動物血液內離子、脂類、蛋白質和各種酶等物質濃度的檢測（cè）。這些檢測項目的變（biàn）化一般都與特定器官的功能有關，對評（píng）估實（shí）驗動物健（jiàn）康狀態以及驗（yàn）證實驗動物造模是否成功等，都具有重要指導意義。由於血生化（huà）涉及項目較多，本號將（jiāng）分兩篇對其進行介紹。

絕大多數血生化檢測都（dōu）可以用血清或肝素血漿樣本檢測，兩者（zhě）的檢測結果會有差異，但這種（zhǒng）差異並無臨床意義。然而，對於需要長期監測動物，相同指標應在監測周期（qī）內選擇相同（tóng）樣本進行檢測。樣本的保存和抗凝劑的使用均應根（gēn）據（jù）不同的檢測項目進行選擇。此外，樣本采集的質量可直接影響檢測結果。

對於大多數血生化項目（mù），樣本應在采集後及時（shí）檢測，如不能及時檢測，3天內可4℃或冷凍（-20℃或更低溫度）保存；若保存時長超出3天，需冷凍（-20℃或更低溫度）保存，切忌將樣（yàng）本（běn）反複凍融後進行檢測。但一些生化項目低溫保存（cún）也會影響其活性，如乳酸脫氫酶和穀草轉（zhuǎn）氨酶。

尿（niào）素、鉀、鈉離子避免使用含銨鹽類抗凝劑進行（háng）檢測；穀丙轉氨酶、肌酸激酶和總蛋白（bái）避免使用枸櫞酸鈉抗凝劑進行檢測。本文僅列出部分生化項的抗凝劑選擇，更多信息可參考WHO 2002年發布的《實驗室檢查中抗凝（níng）劑的使用》。

齧齒動物尤其實驗大小鼠的血生化參考範圍，目前仍沒有建（jiàn）立標準參（cān）考。這與實驗大小鼠的品係眾多（duō）有關。已有文獻證明，不同品係的（de）小鼠血生化會有差異。並且血生化的結果與動物的（de）年齡和性別等因素相關。另外，由於不同機構使用的檢測方法不同，如幹式（shì）生化分析儀和濕式生化分（fèn）析儀，且使（shǐ）用試劑盒品牌不同、試劑盒檢測原理不同等，均會導致（zhì）結果不同。這些因素都導致了實驗（yàn）大小（xiǎo）鼠的血生化標準（zhǔn）參考範圍無法建立，目前可查到的參考範圍，均應根據內部情況進行參考。

蛋白質與肝膽功能檢測

1.   總蛋白（bái）（Total protein, TP）

血液等體液中的蛋白質種類眾多，但目前尚無一種常規檢（jiǎn）測（cè）技術可以對體液中各種類型蛋白質總量進行準確測定。因此，臨床對（duì）體液（yè）中總蛋白質測定（dìng）通常是假設所有的體液蛋白質均是單純蛋白質，且（qiě）各種體液蛋白與化學試劑的反應性均一致。基於以上兩（liǎng）個假設，目前測定總蛋白最（zuì）常用的方法有雙縮脲（niào）法和紫（zǐ）外（wài）分光（guāng）光度法。血清中（zhōng）的（de）總蛋白實際檢測的是除纖維蛋白原以外的成分，因此用血漿測定總蛋白較血清測定值偏高。

總蛋白的濃度主要（yào）反應肝髒合成（chéng）功能和腎髒（zāng）病變造成蛋白質丟失情況，可以（yǐ）用來判斷機體的水合狀態，脫水的（de）動（dòng）物總蛋白濃（nóng）度會相對升高，即高蛋白血症。當動物出現（xiàn）慢性（xìng）肝髒疾病、骨髓瘤、自身免疫性疾病、慢性炎症和感染等，會導致TP和球（qiú）蛋白同時升高。

過度水合動物總（zǒng）蛋白濃度會相對降低，即低蛋（dàn）白血症，此時動物可能會出現浮腫、胸腔或腹腔積液。TP和白蛋白同（tóng）時降（jiàng）低常見於肝功能受損導致蛋白質合成減少、營養不良、蛋白丟失（shī）過多（duō）、消耗增加等病理性因素。

2.   白（bái）蛋白（Albumin, ALB）

ALB由肝實質   細胞合成分泌（mì），是血漿（jiāng）中含量最多的（de）蛋白質，大部分動物的白蛋白占血漿蛋白的35%~50%。ALB是動物（wù）機體內重要的營養（yǎng）蛋白（bái），參與維持內環境穩定，也是血漿中多種（zhǒng）物質的主要轉運蛋白。當出現炎性疾病、漿細胞瘤、淋巴瘤（liú）、腎小球（qiú）腎炎、營養不良、過度水合等，均會導致齧齒動物出現血清白（bái）蛋白的降低；ALB升高（gāo）則多見於脫水動物（wù）。

3.   球蛋白（Globulin，GLB）

球蛋白可以分為α球蛋白、β球蛋白和γ球蛋（dàn）白（bái），大多數（shù）α球蛋白和β球蛋（dàn）白由肝髒合成，γ球蛋白（bái）由漿細胞合成。α球蛋白中比較重要的兩種蛋白質分別是高密度脂蛋白和極低密度脂蛋白；β球（qiú）蛋白包括補體（C3、C4）、轉鐵蛋白和鐵蛋白；γ球蛋白（即免疫球蛋白）包括IgG、IgD、IgE、IgA和IgM。

球蛋白的濃度一般通過總蛋白與白（bái）蛋白的差值來進（jìn）行計算。球蛋白減少主要由於合成減少，如使用免（miǎn）疫抑製劑；球蛋白（bái）的增加多見於γ球蛋白，常見原因有慢性肝髒（zāng）疾病、免疫性疾病、骨髓瘤等。

4.   白蛋白/球蛋白（A/G）

白球比（bǐ）應結合蛋白（bái）質指標進行分析，不同種類、品係、年齡、性別動物（wù）的白球比都（dōu）有差異，很多病（bìng）理狀態會改變白球比。當白蛋白和球蛋白均變化時，如出血導致白蛋白和球蛋白丟失、脫水導致球蛋白和白蛋（dàn）白增加時，A/G比值將變化不大或保持（chí）在正常範圍內；當其中一個（gè）數值發生變化且（qiě）占主導時，那麽A/G比值將發生（shēng）異常，如免疫球蛋白的產生導致A/G比值降低、免（miǎn）疫球蛋白（bái）缺乏導致A/G比值增高。在（zài）臨床上，ALB、TP、GLB和A/G比（bǐ）值應結合一起進行分（fèn）析。

5.   穀丙（bǐng）轉氨酶（Alanine aminotransferase, ALT）

臨床上廣泛用（yòng）來作為肝細胞損（sǔn）傷指標，也是中間代謝的關鍵酶（méi）。ALT主要存在於肝髒，但也廣泛存在於腎髒、心肌、骨骼肌、胰腺等組織中（zhōng），這些組織出現損傷或（huò）壞死，也會導致（zhì）血清ALT水平升高。由於ALT主要存在於細胞質，釋放比較容易，因此ALT升高可出現在組織（zhī）損傷早期。血液中（zhōng）ALT的（de）水平與肝損傷的嚴重程（chéng）度不呈現相關性，ALT通常會在肝損傷12h內升高，並在24~48h內達到峰值，除非存在慢性肝損傷，一般情況（kuàng）下血（xuè）清（qīng）ALT水平會在幾周內恢複正常。比較特殊（shū）的是，豚鼠（shǔ）中ALT活性較低，因此ALT不適合用來（lái）作為判（pàn）斷其肝損傷的標誌（zhì）物。

目前已發現在（zài）人類、大小鼠和狗中，ALT具有兩種亞型（xíng），分別為ALT1和ALT2，其中ALT1主要在腎髒、肝髒、脂肪和心組織中表（biǎo）達；而ALT2主（zhǔ）要在肌肉和脂肪中（zhōng）表達。在小鼠中，ALT2被認為是脂肪變性的標（biāo）誌物。ALT亞型的區分可以（yǐ）更精準反應器官損傷情況（kuàng），但目前ALT分型的檢測尚未廣泛應（yīng）用在實驗動物檢測中。

6.   穀（gǔ）草轉氨（ān）酶（Aspartate aminotransferase, AST）

AST主要存在於肝細胞內（nèi），在正常大鼠血（xuè）清中，細胞質中的AST約占總AST活性82%，線粒體膜上（shàng）的AST約占總AST活性18%。此外，AST也存在於其他（tā）組織中，如心髒、骨骼肌、腎髒、胰腺（xiàn）等，這些組（zǔ）織損傷（shāng）或壞死時，血清（qīng）中AST也會升（shēng）高（gāo）。AST水平（píng）升高表示非特異性肝髒損傷，齧齒動物在應（yīng）激狀態或肌內注射也可能（néng）導致AST升高（gāo），AST升（shēng）高應先檢查血清或血漿樣本是否溶血，結合（hé）肌酸激酶水平，排除是否為肌肉損（sǔn）傷導致AST升高，上（shàng）述原因排除（chú）後，方可考慮為肝損傷導致AST升高。

7.   堿性磷酸酶（Alkaline phosphatase, ALP）

ALP是一組在酸性條件下水解磷酸單酯類（lèi）化合（hé）物的酶，在許多組織中存（cún）在其同工酶，尤其（qí）是肝膽係統、骨骼內的成骨細胞、軟骨內的成軟骨細胞、腸道細胞。ALP水平與齧齒類動物的年（nián）齡（líng）及性別具有相關性，處於生（shēng）長期的未（wèi）成（chéng）年動物ALP水平較高，隨著動物年齡的增長，ALP水平明顯降低；且大多（duō）數（shù）雌性動物ALP水平低於雄性動物（wù）。而ALP的病理（lǐ）性升（shēng）高則常見（jiàn）於發（fā）生肝膽疾病（bìng）、骨骼疾（jí）病、惡性腫瘤（liú）時（shí）的動物。

8.   γ-穀氨酰轉移酶（Gamma-glutamyltransferase, GGT）

GGT存在於許多組織中（zhōng），包括腎（shèn）髒、胰腺、腸道和肌細胞。GGT升高多見於（yú）動物發生肝（gān）髒疾病、膽管阻塞以及急性胰（yí）腺炎等。需要注意的是，GGT在（zài）腎髒中濃度最高，但發（fā）生腎髒疾病時，GGT的增加並不明顯，這是因為GGT會從受損的（de）管狀上皮細胞中釋放到尿液中，而不是血液中。

9.   膽紅素（Bilirubin, Bil）

膽紅素是一種不可溶性分子，由脾（pí）髒內巨噬細胞（bāo）降解血紅蛋白產生，是各（gè）種含血紅素蛋白中的（de）血色素在一些係列酶作用下的降解產物，與脂類的消化吸收及黃（huáng）疸形成（chéng）具有重要（yào）關係。膽（dǎn）紅素在光照下（xià）分解，因此（cǐ），樣本應避光保存以保證結果準確性。當動物出現膽汁運輸（shū）障礙或腸道（dào）吸收不良時，會導致膽紅素降低；當動物（wù）出現溶血性疾病導致紅細胞破壞或內出血時（shí），可使膽紅（hóng）素含量增高。

10.  膽汁酸（Bile acids, TBA）

齧齒動物的膽（dǎn）汁酸代謝與人類有所不同，大小鼠的（de）膽汁酸以膽固醇為原料在肝細胞中合成，由肝源性分子組成，並主要（yào）與（yǔ）牛磺酸（suān）結合。膽汁酸可（kě）以促進脂類的消化吸收、調節膽固醇的代謝以及促進膽汁分泌（mì）。當動物出現肝功能受損、膽道阻塞等疾病時，均會導致膽汁酸水平增加。

腎髒功能檢測

1. 尿素（Urea）

尿素是（shì）哺乳動物蛋白質代謝的主要終末產物，可自由濾過腎小（xiǎo）球，當腎實質（zhì）受損時，腎小球濾過率下降，血尿素濃度會升高，因此可以通過測定尿素水平來（lái）評估腎功能。需要（yào）注意的是，產尿酶菌（如金黃（huáng）色葡萄球（qiú）菌/變（biàn）形杆菌屬/克雷伯菌屬）汙染的血液樣本可（kě）導致尿素分解，導致尿素水平下（xià）降，為避免（miǎn）這種情況，樣本采集後應（yīng）及時進行檢測（cè），如不（bú）能及時（shí）檢測，應將樣本放置在（zài）冰箱冷藏中保存。另外不同性別及（jí）年齡差異，也會（huì）影響尿素水平，隨著動物年（nián）齡增長，尿素水平會呈現下（xià）降（jiàng）趨勢。尿素的增加多見於高蛋白飲食、脫水以及腎功能衰竭等。

2. 肌（jī）酐（Ceatinine, Crea）

血肌酐經（jīng）腎小（xiǎo）球濾過進入原尿，並且不被腎小管重新吸收（shōu），機體內肌酐應保持恒定（dìng），因此（cǐ）測定（dìng）血（xuè）肌酐水平可以用來評估腎功能（néng）。但是和尿素一樣，肌酐不是腎功能（néng）的（de）準確指（zhǐ）標，當腎功能損傷近75%時，方可引（yǐn）起血肌酐水平升（shēng）高（gāo）。肌酐降低則多見於動物營養不良、貧血等。

3. 尿酸（Uric acid, UA）

尿酸是嘌呤堿（jiǎn）基代謝產物，主（zhǔ）要存在於（yú）肝髒（zāng）中，小部分可經肝髒隨膽汁排泄。尿酸可自由濾過腎小球，也可腎小管排泄。因（yīn）此（cǐ），排除外源性尿酸幹擾，血尿酸可反映腎小球濾過功能和腎小管（guǎn）重吸（xī）收功能。當機體出（chū）現急性或（huò）慢性腎炎、多（duō）發性骨髓瘤（liú）等均會導（dǎo）致UA升高；肝髒壞死、肝功能衰竭（jié）等病理原因則會導致UA降低。