
齧齒類動物血常規結果分(fèn)析(xī)注意事項
血液(yè)學檢查是動物疾病狀態評估、術前檢查和常規體檢中必不可(kě)少的內容。評估血常規檢測報(bào)告(gào)的可靠性並解讀其結果是獸醫朋(péng)友們(men)的工作日常。本(běn)文就血液學(xué)檢查的一些要點進(jìn)行分(fèn)析探討。
采血是進行血常(cháng)規檢(jiǎn)查的第(dì)一步,本公眾號曾經發表(biǎo)《獸醫隨筆:實驗動物采(cǎi)血指南》一文,介紹采血量(liàng)和采血點的(de)一般指導意見。
進行血液學分析時(shí)通常(cháng)建議用EDTA抗凝管采(cǎi)集樣本,但采集時應該注意抗(kàng)凝劑和血液的比例。樣本質量(liàng)會顯(xiǎn)著影響檢測結果,常見的(de)樣本質量(liàng)問題有:
抗凝效果不佳導致出現血凝塊,會使血小板(PLT),白細胞(bāo)(WBC),紅細胞(RBC),紅(hóng)細胞壓積(HCT)假性降低;
溶血會使RBC、HCT假性降低的同時平均紅(hóng)細胞血紅蛋白濃度(MCHC)、平(píng)均紅細胞血紅蛋白(MCH)假性(xìng)升高;
乳糜血會使血紅蛋白(Hb)、MCHC、MCH假性(xìng)升高;
樣本不新鮮會使紅細胞形態發生改變導致MCV和HCT假性升高(gāo),MCHC假性降低,同時白細胞形態也(yě)會(huì)發生改變。
紅細(xì)胞、白細胞和血小板是血常規報告中需要(yào)解讀的三(sān)個(gè)方(fāng)麵。
紅細胞
相比於人及其他哺乳類動物,齧齒類動物的紅細胞自有其(qí)特征。倉鼠的RBC約(yuē)6.0微米,豚鼠的約7.8微米。大鼠出生時紅細胞較大(10.03 μm),但在出生後30天內(nèi)變到小於6μm。小鼠RBC大小約4-7μm,隨年齡增長而增加。多色性是齧齒類動物血象的一個常見特(tè)征。在豚鼠血塗片(piàn)上還可見紅細胞疊連。特定疾病模型小鼠中,如β地中海貧血模型小鼠RBC可觀察到異常形態,例(lì)如靶形紅細胞、棘形狀紅細胞(bāo)、淚滴(dī)狀(zhuàng)紅細胞、破碎狀紅細胞、有核紅細胞等。
(圖片來源:https://www.researchgate.net/publication/233535082)
和大多數(shù)哺乳動物(包括人)不同的是,新生齧齒(chǐ)類動物(小鼠、大鼠、豚鼠(shǔ)、沙(shā)鼠)的血紅蛋白和血細胞比容值低於(yú)成年動物;新出生大鼠有16%的網織(zhī)紅細胞,成(chéng)年後(hòu)則減少至2.5%;據報道,大鼠、沙鼠的RBC計數(shù)存在性別差異(yì),雌性(xìng)的計數通常比(bǐ)雄性高(gāo)。不同品係(xì)的小鼠和大鼠(shǔ),血紅蛋白值也會有很大的差異(yì)。
樣本采集部位或麻醉的影響會導致血常規數據的變化。例如,從大鼠尾部采集的樣本中的血(xuè)紅蛋白和紅細胞比容比從腹主(zhǔ)動(dòng)脈或心髒中采集的樣本中要高。豚鼠中已經證實(shí)RBC值可能由於麻醉期間發生脾內紅細胞扣留而降低。
影響RBC參數的非致病性條件還包括妊娠、季節變化等(děng)。在大鼠中,紅細胞比容在妊娠期間減少。在倉鼠中,RBC計數、血紅蛋白濃度和紅細胞比容(róng)在冬眠(mián)期間升高,這是因為在冬眠期間,倉鼠(shǔ)基礎代謝率降低,RBC壽命延長了。
紅細胞和貧(pín)血
紅細胞(bāo)指標重點關注RBC、HCT和Hb,它們的變化可以提(tí)示(shì)動物貧血(xuè)或(huò)紅細胞增多。
齧(niè)齒類動物中並沒有原發性的紅細胞增多症,但可能見(jiàn)於(yú)輕度脫水的動物。貧血則(zé)較為常見。初步判斷為貧血後(hòu),還需要關注平均紅(hóng)細胞(bāo)體積(MCV),MCH和MCHC,可用於輔助判斷貧血類型,這三項都偏低常見於缺(quē)鐵性貧血,而高於正常(cháng)範圍多見於葉酸或維生素B12缺乏引起的(de)貧血。網織紅細(xì)胞是尚未完全成熟(shú)的紅細胞,是(shì)反映骨髓造血(xuè)功能的重要指標。當其(qí)升高時(shí),提示骨髓造血功能旺盛,可能有溶血性貧血、缺鐵性貧血(xuè)等;而當其降(jiàng)低時,可能有再生障礙性貧血、急(jí)性白血病等。
儀器分析的血常規化驗單隻能給出各種細胞的數量,但並不能(néng)給出細胞形態的異常描述。因此(cǐ)為了更準確分析血(xuè)液學檢查結果還建(jiàn)議對血樣塗片進行形態學檢查(chá)。
RBC形態學可區分貧血的原因:出血、溶血、缺鐵、非(fēi)再生性貧血、骨髓(suǐ)疾病或淋巴細胞增生性疾病(白血病)等。
如果(guǒ)診斷為溶血性貧血,則需(xū)要在血塗片中尋找血液(yè)寄(jì)生蟲的證(zhèng)據,如球(qiú)狀附紅細(xì)胞體和鼠血巴爾通(tōng)體可能導致小鼠(shǔ)或大鼠(shǔ)貧血。如果出現小紅細胞增多症、血色素減(jiǎn)少、總蛋(dàn)白低、血小板增多和網織紅細胞計數升高則提示有慢性失血,建議檢查體表寄生蟲,在虱子嚴重感染的豚鼠和大鼠中可見這種現象。
白細胞
白細胞是機體(tǐ)抵禦感染、調控(kòng)炎症、免疫和造血的關鍵。
齧齒類動物的白細胞形態和其他哺乳動物相似,但又有一定區別,齧齒類動物的粒(lì)細胞被稱為嗜異性或假嗜酸性粒細胞,因為它含有紅色顆粒,與嗜酸性粒細胞相似。豚鼠有獨特的Foa-Kurloff細(xì)胞(bāo)(一種T淋巴細胞),含有一個大的細(xì)胞(bāo)質包涵(hán)體。齧齒類動物的白細胞類型(xíng)與其他哺乳動物相似,但淋巴細胞數量遠超(chāo)過粒細胞:淋巴細胞約占86%,中性粒細胞約占10% ~ 25%,單核細胞約占6%,嗜酸性粒細胞約占1% ~ 4%,嗜堿性粒細胞很少。
WBC計數每天都會發生波動,因此采集樣本的(de)位置和時間不(bú)同(tóng),結果也可能不同。中性(xìng)粒細胞計數隨著大鼠年齡(líng)的增長而增加,淋巴細胞計數隨著年齡的增長而減少。
豚鼠的Kurloff 細胞
(圖片來源(yuán):https://en.wikipedia.org/wiki/Kurloff_cell)
白細胞:淋巴細胞
淋巴細(xì)胞增(zēng)多(duō)
淋巴細胞分為T淋巴細(xì)胞和B淋(lín)巴細胞,大多在外周淋巴組織中生成並在血(xuè)液和淋巴組織中循環。淋巴(bā)細胞的增多大多為生理性(xìng)的。反應性淋巴細胞增多的原因包括注射疫苗後的短暫反應、長期(qī)免疫刺激(jī)、甲狀腺功能亢進等(děng);腎上腺皮質功能減退也會導致淋巴細胞增多,並(bìng)常伴隨低血(xuè)糖(táng)、電解質異常(cháng),出現高鉀低鈉和高鈣血症;淋(lín)巴瘤、胸腺瘤(liú)可見淋(lín)巴細胞異常升高,淋巴細胞性白血病則在淋巴細胞(bāo)異常升高的同時伴有其他細胞係的減少。
淋(lín)巴(bā)細胞減少
淋巴(bā)細胞(bāo)減少最常見的原因是內外源(yuán)性皮質類固醇激素增多,導致其從血液循環中轉移到(dào)淋巴(bā)組織中。在急性炎(yán)症反應、病毒感染以(yǐ)及發生內毒素血症和敗(bài)血症時,也可見淋巴細(xì)胞減少。免疫缺陷病毒(dú)感染、免疫抑(yì)製藥物的使用也會讓淋巴細胞生成減少。淋巴回流受(shòu)阻或丟失也會讓其計數減少。
(A)淋巴細(xì)胞,特征(zhēng)是(shì)有深紫色圓形核;(B)單核細(xì)胞,特征是有腎形細胞核;(C)中性粒細胞,特(tè)征為有紫色多小葉細胞核。
(圖片(piàn)來源:Bjorner & Zhu, 2019)
白細胞:中性粒細(xì)胞
中性粒細胞(bāo)增多
與其他哺乳動物一樣,急性炎症反應的特征(zhēng)是中性粒細胞增多並有(yǒu)核(hé)左移。但(dàn)並不是出現中性(xìng)粒細胞(bāo)增多就意味著(zhe)急性炎症反應,動(dòng)物經曆劇烈運動(dòng)、驚嚇傷心等強烈情緒後也可出現生理性(xìng)中性粒細胞增多,但不會出現核左移。
應激或皮質類固醇也可導致動物出現中性粒細胞數(shù)量增加(jiā),無左移(yí)。
此外慢(màn)性粒細胞性白血病、中(zhōng)性粒細胞功能障礙也可使中性粒細胞數(shù)量增加(jiā),同時出現核左移、多組織髓外生成粒細胞、血小板減(jiǎn)少等異常。
正常情況下,外周血液中(zhōng)性粒細胞以分(fèn)葉核為主,胞核常分為2~5葉,杆狀核(hé)較少。中性杆狀核粒細胞增多或(和(hé))出現晚幼粒細胞、中幼粒細胞,甚至原始/早幼粒細胞(bāo)的現象,稱為核左移。
中性粒細胞(bāo)減少
中性粒細胞減少(shǎo)也非常常(cháng)見,其中(zhōng)臨床常見的因(yīn)素為嚴重的細菌感(gǎn)染,例如肺(fèi)炎、敗血症、腹膜炎(yán)等,常會伴隨(suí)核左移和中(zhōng)毒性變化。骨髓疾病、藥物毒性、病(bìng)毒感染和腫瘤等也可造成中性粒細胞減(jiǎn)少,同時可(kě)能會伴(bàn)有紅(hóng)細胞和(hé)血(xuè)小板的減少。
白細(xì)胞:嗜酸性粒細胞
嗜酸(suān)性粒細胞主要聚集在皮膚、消化道和呼吸道黏膜等疏鬆結締組織中,它的增多常見於寄生蟲感染的動物(wù)和發生I型(xíng)超敏反應的(de)動物。也由於其分布特點,大多血液寄生(shēng)蟲不會引起嗜酸性粒細(xì)胞增多。此外,還有一些臨床原因(yīn)可導(dǎo)致嗜酸性粒細胞增多,比(bǐ)如嗜(shì)酸性粒細胞性腸炎、嗜酸性肌炎等炎症(zhèng)反應;某些能促(cù)進嗜酸(suān)性粒細胞生成和釋放的腫瘤(淋巴瘤、鱗狀細胞癌等);腎上腺皮質(zhì)機能減退等。
白細胞:嗜堿性粒細胞
嗜(shì)堿性(xìng)粒細胞參與遲發性過敏和寄生蟲免(miǎn)疫反應,因此嗜堿性粒細胞增多症常和嗜酸性粒細胞增多症同時發生。此外還可見於高脂血症、嗜堿性粒細胞性白血病和骨髓增(zēng)生性疾病。
白細胞:單核細胞
單(dān)核細胞等主要功能是(shì)吞噬作用、調節炎症反應、參與抗原提呈、參與鐵(tiě)的調節。因此當機體(tǐ)出現急性或慢(màn)性炎症、組織壞死時,都會導致單核細胞增(zēng)多。中性粒細胞減少(shǎo)時(shí)也會出現單核(hé)細胞代償(cháng)性增加。其他不常(cháng)見的(de)原因還包括應激或類固醇、單核細胞(bāo)白血病等(děng)。齧齒類動物中,多(duō)達25%的F344大鼠會發生單核(hé)細胞性白血病。發病動物外周血中,可見非典型(xíng)性單核細(xì)胞,白細胞計數極度增高和溶血性貧(pín)血(xuè)。
血小板
血小板為(wéi)骨髓巨(jù)核細胞胞漿裂解脫落的小塊胞質,其主要(yào)作用(yòng)是凝血和止血,修(xiū)補破損血管。齧齒類動(dòng)物的血小板數量和凝血過程與其他哺乳動物(wù)相似(sì)。在(zài)小鼠、大鼠或豚鼠中,未觀察到血(xuè)小板計數的性別或品(pǐn)係差異。大鼠(shǔ)的血小板會聚集,計數往往不(bú)可靠。
血小(xiǎo)板減少
血小板減少症發生時,動物可出(chū)現瘀斑、瘀點、黏膜出血(xuè)、止血困難等。但血液分析儀判讀為血小板減少時,應做血塗片確(què)認是否發(fā)生凝(níng)集(jí),因為血小板做血液采集、運輸、儲存過程(chéng)中會活化並凝集進而影響機器讀(dú)取數據。通過無創性靜脈穿刺采血、使(shǐ)用檸檬酸鹽抗凝劑、減少采樣後儲存時間、避免低溫等措施可以減少這種影響。
通常血小(xiǎo)板減少是一過性的,跟多種係統性疾病都有關聯,隨著(zhe)疾病的康複,血小(xiǎo)板計數也(yě)會恢複正常。持續性的或進行性的血小板減少症表明血小板生成或消耗持續失衡。例如血小板減少伴隨白細(xì)胞減(jiǎn)少和(或)貧血通常提示骨髓疾病引起的造血功能障礙;免疫介導的破壞等。
血小板增多
血小板計數增多可能由原發性血小板增(zēng)多症、骨髓增殖性(xìng)疾病(bìng)和繼發(fā)性血小板(bǎn)增多症引起。