
檢測到陽性結果,然後呢?
盡管所有實驗動物管理人員都(dōu)不希望拿到一份微生物檢測陽性的報告,但實際上(shàng),這種情況無法(fǎ)避免。那拿到陽性報告後我們(men)應該怎(zěn)麽辦呢(ne)?
在采取任何行動之(zhī)前,需要第一時間聯係檢測實(shí)驗室,確認應如何解(jiě)讀陽性報告。雖然大多數情況(kuàng)下,“陽(yáng)性”意(yì)味著感染的存在,但並非所有的“陽性”結果(guǒ)都是可靠(kào)的,即使結果可靠有些時候也並不意味著動物(正(zhèng)在)發生(shēng)感染,甚至(zhì)有些時(shí)候,動(dòng)物(wù)正在感染某種病原體,也並不意味著一定要采取幹預措施。這取決於多個(gè)因素,包括病原體的特性(xìng)、檢(jiǎn)測方法的選(xuǎn)擇、檢測工(gōng)作(zuò)的質控(kòng)過程、檢測試劑的(de)可靠性等(děng)。和檢測實驗室的充分溝通可以更準確的(de)了解檢測報告中(zhōng)的“陽性(xìng)”的可靠性和意義,以便決定後續應對措施。
有(yǒu)一些病原體感染具有自限性(例如MHV、仙台病毒等),因此在感染後期,常會(huì)出現核酸檢測是陰性但抗體檢測是陽性的情況;而另一些病原(yuán)體(tǐ)(例如牛棒狀杆菌、MNV等)常會呈現持續性感染,即(jí)使沒有臨床症狀,也會長期排毒/菌;采集環境樣(yàng)本檢測到某種病原體核酸(suān)陽性可能是由(yóu)於新發生(shēng)的感染所致,也可能是既往感染或其(qí)它原因殘留(liú)的核酸所(suǒ)致;絕大(dà)多數情(qíng)況下血清學檢測結果都(dōu)是可靠的,但是偶爾(ěr)也會有交叉(chā)反應所導致(zhì)的假陽性結果;檢測實驗室的質控水平和試劑的穩定性(xìng)更(gèng)是直接決定結果是否可靠。
在確認首次報告的陽性結果的可信度後,可能(néng)會需要擴大檢測範圍、重新采樣或更換檢測方法才能確認被檢測動物是否感染。確認感染後,依然會有諸多因素影響管理者的(de)決策:
01被檢測到陽(yáng)性(xìng)的(de)動物來源
尚處(chù)於檢疫期的動(dòng)物中如果檢(jiǎn)測到陽性結果,往(wǎng)往會被拒絕進入設施(shī);如果是已經處於實(shí)驗中的動物則會根據(jù)檢測到的病原體種類再做決定(dìng),例如是否人獸共患病原體,是否影響動物健康,是(shì)否影響實驗數據等;如果是生產性質的設施,通常需要立即(jí)采取隔離措施(shī),必要(yào)時撲殺和(或)重(chóng)新淨化動物,同時對環境進行徹底清潔消毒。
02檢(jiǎn)測到的病原體種類
如果檢測到的病原體是人獸(shòu)共患病原,例如漢坦病毒、結核分枝杆菌等,則應(yīng)該立即采取措施,隔離並撲(pū)殺陽性動物。同時要密切監測與其有直(zhí)接或間接接觸的同一微生物單元的其它陰(yīn)性動物,如果是非人靈長類動物,對每一個體都應該進行檢測。
而對(duì)於那些對動物健康有(yǒu)影響或者對實驗數據有重要影響的病原體,也應該立即擴大篩(shāi)查範(fàn)圍,隔(gé)離發生感(gǎn)染的微生物單元,停止繁(fán)殖和新引進動(dòng)物,淘汰所有非必要的動物,對珍(zhēn)貴(guì)品(pǐn)係,可重新淨化(huà)。例如發(fā)生小鼠肝炎病毒感染或牛棒狀杆菌感染,由(yóu)於它們感染免疫缺陷動物後臨床症狀明(míng)顯(xiǎn),且顯著影響實驗,大多數管理者(zhě)都會選(xuǎn)擇查明感(gǎn)染源和(hé)感染範圍,采取措施清除感染。而遇到MNV時,一(yī)些設施負責人則會選擇截然不同的策略,免疫正常和(hé)大多數免疫缺陷小鼠感染MNV後不會表現臨床症狀,僅幹擾素α、β、γ受體和STAT1基因缺失的小鼠感染MNV後會出現體重減輕、豎毛和弓背等全身性疾病,且有較高(gāo)死(sǐ)亡率。此外,MNV對巨噬(shì)細胞(bāo)和樹突狀細胞的趨向性可能會改變免疫(yì)反應影響(xiǎng)免疫相關研(yán)究,還可能會幹擾涉(shè)及腸道疾病的研究。因此不飼養相關小鼠和不做相關研究的設施並不會把MNV作為自己的(de)監測(cè)項目;而(ér)另(lìng)一些設施盡管也監測這一項目(mù),但(dàn)僅僅是(shì)為了了解(jiě)動物感染情況,實(shí)行“分級管理”,並不會一刀(dāo)切地將所有陽性動物(wù)都(dōu)拒之門外;當然(rán),也有管理者(zhě)嚴格要求所有動物必須為陰性,發生感染後會采取清除措施。上述“分級管理”的策略盡管是一種妥協(xié),但(dàn)在現有條件下可能會更符合(hé)大多數管理者的理念。
此外發生感(gǎn)染(rǎn)後在設施內的(de)流行率也會(huì)影響決策,例如,在現代設(shè)施中如果動物群體中存在呼腸孤病毒-3型感染,流行率也隻會維持在非常低的水平,但如果(guǒ)發生MHV感染,即使IVC籠架(jià)可以很大程度上減少不同籠(架)動物之間的交叉汙(wū)染,但由於(yú)其極強的傳(chuán)播效率,流行率也可以(yǐ)輕鬆突破50%。因此對(duì)於傳播性弱,流(liú)行率低的病原體,管理者往往更能容忍。
另外,如(rú)果你的動物供應商無法提供(gòng)特定病原體陰性的動物,也沒(méi)有辦法將其從你的設施清(qīng)除。近(jìn)幾年,越來越(yuè)多的機構從出現皮屑症狀的小鼠(shǔ)中分離到木糖葡萄球菌,作為一種條件致病菌,其在小鼠皮膚(fū)表麵有非常高的檢出率,美國Charles River實驗室近年公布(bù)的數據顯示陽(yáng)性率(lǜ)為51.8%(n=1426),我(wǒ)國第三方檢測機構蘇州西山生物的檢測陽性率為43.2%(n=192),幾乎所有的動物(wù)供應商都沒(méi)有將木糖葡萄球菌列入自己的應排(pái)除病原體清單或(huò)常規監測清單(dān)。在這一背景下,即使檢測到陽性(xìng)結果,除了對出現症狀的動物進行處理外,並無更(gèng)多選擇。
03設施的基本情況
設施情況很多時(shí)候也嚴重影響管理者的決策,包括設施(shī)和種群總(zǒng)規模,發生汙染的區域和種群大小(xiǎo),人力資源是否充(chōng)足,是否有足夠空間,技術儲(chǔ)備是(shì)否充分,項目(mù)負責人是否(fǒu)支持和配合等。對陽性動物進行(háng)排查和處理是一(yī)係列高度專業性的操作,所有參與者(zhě)之間都要密切配合精密運轉(zhuǎn),任何環節的細微漏洞(dòng)都會讓清除工作功虧一簣。
04預算(suàn)
預算則是最不可忽視的一點,不論是篩查(chá)確認感染範圍、淘汰感染動物、空間和籠器具的清洗消毒、重新淨化或引進動(dòng)物、處(chù)理後的動物和環境的確認等都需要不菲的成本。也正是由於一旦(dàn)發生感(gǎn)染,後(hòu)續處理成本高昂,對實驗項(xiàng)目的影響大,故而實驗動物從業人員的普(pǔ)遍共識是預防重於治理。
綜上所(suǒ)述,在檢測報(bào)告(gào)中出現陽性結果後,首(shǒu)先應確認檢測結果的可靠性並正確(què)解讀報告,如果確認動物感染,則需要管理者根據感染動物的來源(yuán)、病原體(tǐ)種類、設施的(de)基本情況、預算等多個因素綜合考慮,決定是容忍該病(bìng)原體在自己的設施內有一(yī)定程度的流行,還是必(bì)須清除。